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제한효소 및 DNA ligation 실험 레포트 1. Title 제한효소를 이용한 plasmid DNA의 절단 및 DNA ligation 2. Abstract 제한효소(restriction enzyme)는 DNA 분자내의 특정한 염기서열을 인식하고, 인식한 서열 내의, 또는 근처의 특정한 부위에서 double-stranded DNA를 절단하는 endonuclease이다. 제한효소를 이용하여 DNA를 절단하는 것은 DNA 재조합기술에서 가장 기본적인 과정 중의 하나이다. 이번 실험에서는 pKS plasmid와 pACYC184 plasmid를 제한효소 EcoR1과 Ssp1을 각각 처리하거나, EcoR1+Ssp1을 동시 처리하여 잘려진 단편의 크기와 개수를 비교하고 확인한다. 또한 ligase를 이용하여 insert DNA를 vector DNA에 삽입하는 .. 2022. 2. 6.
Plasmid DNA isolation 실험 레포트 1. Abstract Plasmid DNA란 세포내에 염색체와는 독립적으로 존재하는 환상의 작은 DNA 분자이다. 세포에서 plasmid DNA를 가져오기 위해서는 chromosomal DNA와 분리를 해야 한다. 이때 주로 alkaline lysis method가 이용된다. 이 method는 세포벽을 파괴하는 solution 1과 chromosomal DNA 변성을 일으키는 solution 2, chromosomal DNA와 엉기게 되어 최종적으로 plasmid DNA를 분리되게 만드는 solution 3으로 이루어진다. 이후 centrifuge 된 용액에 phenol/chloroform을 통해 protein을 변성시키고 isopropyl alcohol과 75% EtOH로 washing 한다. 결과 확.. 2022. 2. 6.
유전 형질의 변환(transformation) 실험 레포트 1. Abstract DNA를 bacteria 세포 내로 주입하는 과정을 Transformation이라 한다. 형질전환 방법 중 electroporation은 살아있는 세포가 강한 전기장에 놓이게 되면 순간적으로 세포막이 불안정하게 되고 세포막에 pore가 형성되어 세포 내부와 외부의 물질에 대해 투과성을 갖게 되는 현상을 말한다. ‘competent cell’이란 bacteria나 yeast cell을 어떤 처리에 의하여 변화시킨 세포로써, 외부 DNA를 받아들여 자신을 형질 전환시킬 수 있는 ‘능력이 있는 세포’이다. 이번 실험에서는 E. coli의 competent cell에 electroporation을 통해 pKS와 pACYC184 plasmid를 주입하여 형질전환 시키고 그 효율을 알아보았다... 2022. 2. 6.
DPPH assay를 이용한 식품 중 항산화능 측정 결과레포트 1. Result A의 값은 코코아 파우더의 흡광도와 보정값을 뺀 값이다. 이를 식에 대입하여 DPPH radical 소거능을 계산하였다. [표 2] Ascorbin acid의 standard curve 식은 y = 18.338x + 16.765, R² = 0.9871으로 나왔으며, 코코아파우더의 standard curve 식은 y = 0.5183x + 6.0505, R² = 0.9986으로 나왔다. 2. Discussion 실험 결과에 따르면 코코아파우더의 농도가 증가할수록 흡광도가 감소하고 DPPH radical 소거능이 증가하는 것을 알 수 있다. 이는 코코아파우더가 많아질수록 DPPH에 포함된 free radical이 제거되는 양이 증가하면서 DPPH 용액의 짙은 보라색이 점점 옅어지기 때문이라고.. 2022. 2. 6.
DPPH assay를 이용한 식품 중 항산화능 측정 예비레포트 1. Introduction 1) 활성산소 및 항산화물질 체내 대사 과정 중 미토콘드리아에서 산소의 2%가 활성산소로 변환된다. 활성산소는 불안정하며 일반적인 삼중 항 상태의 산소(3O2)보다 반응성이 커서 인체 내의 성분들을 산화시킨다. 세포 간 신호 전달, 면역작용과 같은 좋은 기능을 하지만, 그 양이 과도하면 세포막, DNA 등 세포를 공격하여 질병을 유발한다. 환경오염, 과식, 스트레스, 흡연, 과도한 운동으로 인하여 활성산소 생성이 촉진된다. 몸 속의 아미노산 산화, 핵산 손상 등이 발생하면 돌연변이나 암의 원인이 될 수 있다. 항산화물질은 산화를 방지하여 활성산소에 의한 손상을 막는 역할을 하며 폴리페놀, 카로틴, 비타민류, 토코페롤, 미네랄, 이소플라본류 등이 포함된다. 2) 항산화 시험법 .. 2021. 10. 16.

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