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효소의 반응속도론(enzyme kinetics) 예비레포트 1. Title 효소의 반응속도론 2. Introduction 1) 효소(정의&종류) 효소(enzyme)란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매이다. 기질(substrate)과 효소의 활성부위에 결합하여 효소-기질 복합체를 형성한다. 효소는 크게 6종류로 구분된다. (1) 분자들 사이에 전자를 옮기며 산환-환원반응을 촉매 하는 산화환원효소(oxidoreductases)가 있으며 해당과정 첫번째 참여 효소인 탈수소효소(dyhydrogenase)와 산화(oxidase) 등이 있다. (2) 분자 간 작용기를 옮기는 전이효소(transferase)가 있으며 아미노기운반효소가 포함된다. (3) 물을 첨가하여 분자를 쪼개는 가수분해효소(hydrolase)가 있으며, 펩티데이스(peptidase)와 아밀레이스(.. 2021. 9. 30.
alpha-amylase의 최적 pH 조사 결과레포트 1. Abstract 효소는 단백질로 구성되어 화학반응의 속도를 높이는 촉매제 역할을 하며, 기질과 결합하여 반응한다. 효소의 복잡한 단백질 3차원 구조로 인해 효소는 높은 특이성을 가져 기질과 정확한 상호작용을 이룬다. 이때 효소의 활성에 온도와 pH가 중요하다. 특정 pH에 최적의 활성을 나타내며 체내의 대부분 효소는 중성 pH에서 최대 활성을 보인다. 구강 내에 있는 amylase 중 알파-amylase의 최적 pH를 조사했다. 환원당에 의해 3,5-dinitrosalicylic acid가 환원되어 생성된 3-amino-5-nitrosalicyclic acid를 550 nm 파장에서 측정하여 당을 정량했다. DNS 시약의 standard curve를 그리고 채취한 타액의 환원당의 흡광도를 측정하여 .. 2021. 9. 30.
알파-amylase의 최적 pH 조사 예비레포트 1. Title 알파-amylase의 최적 pH 조사 2. Introduction 1) 효소(enzyme) 생명체 내에서 여러 화학반응이 일어나는데, 이러한 반응 속도를 높이는 촉매제를 효소라고 한다. 효소가 촉매 하는 반응물을 기질(substrate)이라고 하며 효소와 기질이 결합하는 부위를 활성부위 또는 기질 결합 부위라고 부른다. 하나의 효소는 보통 하나의 단일 화학반응이나 한 종류의 기질에만 반응하기 때문에 효소는 높은 특이성을 보인다. 단백질로 이루어진 효소의 복잡한 3차원적 구조 때문에 효소와 기질의 정확한 상호작용이 이루어진다. 효소는 크게 6종류로 구분된다. 분자들 사이에 전자를 옮기는 산화환원효소, 분자 간 작용기를 옮기는 운반효소, 물을 첨가하여 분자를 쪼개는 가수분해효소, 원자나 작용.. 2021. 9. 21.
분광광도계 및 단백질 정량분석 결과레포트 1. Abstract 단백질 내 아미노산의 미지시료의 단백질 농도를 구하기 위해서 Bradford 법과 UV 법을 이용하였다. Bradford 법은 Coomassie Blue G dye의 세가지 형태의 평형에 기초하고 단백질 농도가 많아질수록 파란색이 짙게 나타나며, 다른 정량법들에 비해 감도가 좋은 편이다. UV 법은 주로 방향족 아미노산을 들뜬 상태로 만들어 흡수되는 빛의 양을 측정한다. Lambert-Beer 법칙에 기반하여 시료들의 흡광도 standard curve를 그렸다. 그래프의 추세선을 추정하여 미지시료 흡광도에 따른 단백질 농도를 구하였다. Bradford법의 미지시료 단백질 농도는 53.61ug/ml로 나왔으며, UV법의 미지시료 단백질 농도는 0.21mg/ml로 나왔다. 2. Resu.. 2021. 9. 21.
분광광도계 및 단백질 정량분석 예비레포트 1. Title Spectrophotometer의 원리 및 이를 이용한 단백질의 정량분석 2. Introduction 1) 분광광도계(Spectrophotometer) 물체에 빛을 가하면 빛은 물체에 반사 및 흡수되거나 통과된다. 이때 물체의 농도와 파장을 통해 물체에 의해 흡수되는 빛의 양이 결정된다. 물체가 빛을 흡수하는 정도를 흡광도라고 부르며, 흡광도를 측정하는 기기를 분광광도계(Spectrophotometer)라고 한다. 시료의 화학적 특성마다 흡수되는 빛의 양이 다르기 때문에 분광광도계를 통해 이를 활용한 분석이 가능하다. 즉, 빛의 흡수 정도를 파악하면 용액 중에 있는 빛을 흡수하는 화학물질의 양을 정량 할 수 있다. 이런 종류의 실험에 주로 사용하는 빛은 자외선(ultraviolet, 18.. 2021. 9. 9.