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식품 중 total cholesterol 정량(비색법) 결과레포트 1. Abstarct 지질 추출법을 통해 식품에 포함된 지질 (콜레스테롤, 인지질, 중성지방, 유리지방산 등)만을 추출, 정제할 수 있으며, 생화학적 검사법을 통해 총 콜레스테롤 함량을 측정할 수 있다. 콜레스테롤 정량 시험 법에는 GC법, GC 신속분석법, LC법, 효소측정법 등이 있으며 이번 실험에서는 효소측정법을 이용하여 식품 중의 총 콜레스테롤 함량을 정량한다. Cholesterol esterase에 의해 분해된 free cholesterol은 cholesterol oxidase, peroxidase에 의해 quinoneimine가 생성되며 적색을 띈다. 반응이 일어난 시료를 통해 standard curve를 작성하고 버터와 마요네즈의 흡광도를 바탕으로 콜레스테롤 함량을 추정한다. 버터의 콜레스테.. 2021. 10. 16.
식품 중 total cholesterol 정량(비색법) 예비레포트 1. Introduction 1) Cholesterol(정의, 기능 등) 지질은 크게 중성지방, 인지질, 콜레스테롤(cholesterol)로 분류된다. 탄소가 네 개의 고리모양을 하고 있는 cholesterol은 소수성을 가진 대표적인 스테롤로서 동물성 식품에만 함유되어 있다. 음식에 있는 cholesterol은 지방산과 결합한 ester형으로서 췌액 중 cholesterol esterase(콜레스테롤 에스테르 가수분해 효소)에 의해 free cholesterol(유리 콜레스테롤)과 free fatty acid(유리 지방산)로 분해된다. 인지질과 더불어 cholesterol은 세포막 구성 성분이다. 간, 신장, 뇌, 신경조직에는 cholesterol을 다량 함유하고 있다. 막 유동성의 중요한 조절인자로서.. 2021. 10. 10.
SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis에 의한 단백질의 분리 결과레포트 1. Results 모든 효소들의 효소 size는 48 ~ 63 kDa로 측정되었다. 효소의 size는 1>4>2>3 순서이며, band의 길이는 2번이 가장 길고 band의 두께는 3번이 가장 두껍다. 2. Discussion SDS-PAGE는 전기영동기술이며, 전기 영동 이동성(polypeptide chain의 길이 또는 분자량 뿐만 아니라 protein folding, posttranslational modification과 다른 인자들에 의한)을 이용한 기술이다. 이미 알고 있는 분자량 단백질(분자량 마커)의 이동도를 측정한 전기영동 결과로 밴드의 유무나 굵기 등을 비교하며 단백질의 크기와 발현량을 확인한다. 겹치는 band 없이 각 sample들이 곧게 내려온 것을 알 수 있다. Alpha-am.. 2021. 10. 10.
SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis에 의한 단백질의 분리 예비레포트 1. Introduction 1) 전기영동(electrophoresis) 단백질의 아미노산 결합, 3차원적 구조, 반응 메커니즘을 이해하기 위해서는 먼저 원하는 단백질을 분리 및 정제해야 한다. 이때 전기영동 방법을 이용하여 단백질을 분리할 수 있다. 전기영동이란 수용액상에서 전하를 갖는 분자(단백질, 핵산 등)가 전기장 내에서 지지체(polyacrylamide gel, agarose gel)를 통해 이동하는 현상이다. 단백질을 전기장 하에 각각 다른 속도로 이동하는 방법을 이용하여 분리한다. 단백질의 이동 속도는 단백질 분자량, 단백질의 전하, 단백질의 모양에 영향을 받는다. 전기영동을 한 후에 단백질에만 결합하는 Coomassie blue와 같은 색소로 염색하면 분리된 단백질을 눈으로 확인할 수 있다.. 2021. 10. 4.
효소의 반응속도론(enzyme kinetics) 결과 레포트 1. Abstract 효소는 화학반응을 촉진하는 단백질 촉매로 기질과 결합한다. 효소는 크게 6가지로 구분된다. 효소의 촉매 반응 속도와 이것이 실험의 여러 매개변수에 따라서 어떻게 변화하는가에 관해 연구하는 분야를 enzyme kinetics라고 한다. 반응 속도에 영향을 주는 핵심 요소 중 하나는 기질의 농도[S]이다. 기질농도에 따른 효소반응속도를 결정하고 Lineweaver-Burk plot을 이용하여 효소반응의 Vmax와 Km을 결정한다. 이번 실험에서는 potato acid phosphatase와 wheat germ acid phosphatase를 이용하여 기질인 p-nitrophenyl phosphate의 분해 생성물인 p-nitrophenol (황색)을 415 nm에서 흡광도를 측정하여 반.. 2021. 10. 4.