plasmid DNA2 제한효소 및 DNA ligation 실험 레포트 1. Title 제한효소를 이용한 plasmid DNA의 절단 및 DNA ligation 2. Abstract 제한효소(restriction enzyme)는 DNA 분자내의 특정한 염기서열을 인식하고, 인식한 서열 내의, 또는 근처의 특정한 부위에서 double-stranded DNA를 절단하는 endonuclease이다. 제한효소를 이용하여 DNA를 절단하는 것은 DNA 재조합기술에서 가장 기본적인 과정 중의 하나이다. 이번 실험에서는 pKS plasmid와 pACYC184 plasmid를 제한효소 EcoR1과 Ssp1을 각각 처리하거나, EcoR1+Ssp1을 동시 처리하여 잘려진 단편의 크기와 개수를 비교하고 확인한다. 또한 ligase를 이용하여 insert DNA를 vector DNA에 삽입하는 .. 2022. 2. 6. Plasmid DNA isolation 실험 레포트 1. Abstract Plasmid DNA란 세포내에 염색체와는 독립적으로 존재하는 환상의 작은 DNA 분자이다. 세포에서 plasmid DNA를 가져오기 위해서는 chromosomal DNA와 분리를 해야 한다. 이때 주로 alkaline lysis method가 이용된다. 이 method는 세포벽을 파괴하는 solution 1과 chromosomal DNA 변성을 일으키는 solution 2, chromosomal DNA와 엉기게 되어 최종적으로 plasmid DNA를 분리되게 만드는 solution 3으로 이루어진다. 이후 centrifuge 된 용액에 phenol/chloroform을 통해 protein을 변성시키고 isopropyl alcohol과 75% EtOH로 washing 한다. 결과 확.. 2022. 2. 6. 이전 1 다음