강의 및 공부/생화학&분자생물학 레포트17 SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis에 의한 단백질의 분리 예비레포트 1. Introduction 1) 전기영동(electrophoresis) 단백질의 아미노산 결합, 3차원적 구조, 반응 메커니즘을 이해하기 위해서는 먼저 원하는 단백질을 분리 및 정제해야 한다. 이때 전기영동 방법을 이용하여 단백질을 분리할 수 있다. 전기영동이란 수용액상에서 전하를 갖는 분자(단백질, 핵산 등)가 전기장 내에서 지지체(polyacrylamide gel, agarose gel)를 통해 이동하는 현상이다. 단백질을 전기장 하에 각각 다른 속도로 이동하는 방법을 이용하여 분리한다. 단백질의 이동 속도는 단백질 분자량, 단백질의 전하, 단백질의 모양에 영향을 받는다. 전기영동을 한 후에 단백질에만 결합하는 Coomassie blue와 같은 색소로 염색하면 분리된 단백질을 눈으로 확인할 수 있다.. 2021. 10. 4. 효소의 반응속도론(enzyme kinetics) 결과 레포트 1. Abstract 효소는 화학반응을 촉진하는 단백질 촉매로 기질과 결합한다. 효소는 크게 6가지로 구분된다. 효소의 촉매 반응 속도와 이것이 실험의 여러 매개변수에 따라서 어떻게 변화하는가에 관해 연구하는 분야를 enzyme kinetics라고 한다. 반응 속도에 영향을 주는 핵심 요소 중 하나는 기질의 농도[S]이다. 기질농도에 따른 효소반응속도를 결정하고 Lineweaver-Burk plot을 이용하여 효소반응의 Vmax와 Km을 결정한다. 이번 실험에서는 potato acid phosphatase와 wheat germ acid phosphatase를 이용하여 기질인 p-nitrophenyl phosphate의 분해 생성물인 p-nitrophenol (황색)을 415 nm에서 흡광도를 측정하여 반.. 2021. 10. 4. 효소의 반응속도론(enzyme kinetics) 예비레포트 1. Title 효소의 반응속도론 2. Introduction 1) 효소(정의&종류) 효소(enzyme)란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매이다. 기질(substrate)과 효소의 활성부위에 결합하여 효소-기질 복합체를 형성한다. 효소는 크게 6종류로 구분된다. (1) 분자들 사이에 전자를 옮기며 산환-환원반응을 촉매 하는 산화환원효소(oxidoreductases)가 있으며 해당과정 첫번째 참여 효소인 탈수소효소(dyhydrogenase)와 산화(oxidase) 등이 있다. (2) 분자 간 작용기를 옮기는 전이효소(transferase)가 있으며 아미노기운반효소가 포함된다. (3) 물을 첨가하여 분자를 쪼개는 가수분해효소(hydrolase)가 있으며, 펩티데이스(peptidase)와 아밀레이스(.. 2021. 9. 30. alpha-amylase의 최적 pH 조사 결과레포트 1. Abstract 효소는 단백질로 구성되어 화학반응의 속도를 높이는 촉매제 역할을 하며, 기질과 결합하여 반응한다. 효소의 복잡한 단백질 3차원 구조로 인해 효소는 높은 특이성을 가져 기질과 정확한 상호작용을 이룬다. 이때 효소의 활성에 온도와 pH가 중요하다. 특정 pH에 최적의 활성을 나타내며 체내의 대부분 효소는 중성 pH에서 최대 활성을 보인다. 구강 내에 있는 amylase 중 알파-amylase의 최적 pH를 조사했다. 환원당에 의해 3,5-dinitrosalicylic acid가 환원되어 생성된 3-amino-5-nitrosalicyclic acid를 550 nm 파장에서 측정하여 당을 정량했다. DNS 시약의 standard curve를 그리고 채취한 타액의 환원당의 흡광도를 측정하여 .. 2021. 9. 30. 알파-amylase의 최적 pH 조사 예비레포트 1. Title 알파-amylase의 최적 pH 조사 2. Introduction 1) 효소(enzyme) 생명체 내에서 여러 화학반응이 일어나는데, 이러한 반응 속도를 높이는 촉매제를 효소라고 한다. 효소가 촉매 하는 반응물을 기질(substrate)이라고 하며 효소와 기질이 결합하는 부위를 활성부위 또는 기질 결합 부위라고 부른다. 하나의 효소는 보통 하나의 단일 화학반응이나 한 종류의 기질에만 반응하기 때문에 효소는 높은 특이성을 보인다. 단백질로 이루어진 효소의 복잡한 3차원적 구조 때문에 효소와 기질의 정확한 상호작용이 이루어진다. 효소는 크게 6종류로 구분된다. 분자들 사이에 전자를 옮기는 산화환원효소, 분자 간 작용기를 옮기는 운반효소, 물을 첨가하여 분자를 쪼개는 가수분해효소, 원자나 작용.. 2021. 9. 21. 이전 1 2 3 4 다음